普魯士藍(lán) (PB) 實(shí)際上是工業(yè)革命期間發(fā)現(xiàn)的第一種合成色素。 它是在 1704 年由一位試圖產(chǎn)生另一種顏色的化學(xué)家偶然開發(fā)出來的。直到 1867 年德國病理學(xué)家 Max Perls 描述了它的原始配方后，它才被用作組織化學(xué)染色——因此通常被稱為普魯士藍(lán)。PB 染色不是真正的特殊染色技術(shù)，而是一種組織化學(xué)反應(yīng)。

它能染色什么？

PB 用于檢測組織中鐵的存在。這是一項(xiàng)極其敏感的測試，甚至可以檢測細(xì)胞中的單個鐵顆粒。雖然鐵對生命至關(guān)重要，但它也有毒，因?yàn)樗軌蛐纬煽蓳p害細(xì)胞的自由基。所以身體必須保護(hù)自己免受這種元素的影響，它通過使用鐵儲存蛋白來做到這一點(diǎn)。含鐵血黃素是一種存在于細(xì)胞內(nèi)的鐵儲存復(fù)合物。它主要存在于吞噬性巨噬細(xì)胞內(nèi)，并且在出血后血紅蛋白分解時在這些細(xì)胞中尤為突出。

因此，在顯微鏡下，鐵的存在是通過展示含鐵的含鐵血黃素來識別的，當(dāng)用蘇木精和伊紅 (H&E) 染色檢查時，含鐵的含鐵血黃素在細(xì)胞中顯示為顆粒狀棕色色素。雖然使用 H&E 可見，但其他色素可以染成類似的顏色，因此需要使用 PB 組織化學(xué)染色技術(shù)將含鐵血黃素與其他棕色色素區(qū)分開來。

染色的一般原則

自從 Perls 最初的描述以來，出現(xiàn)了各種染色方案，但所有方案都用于實(shí)現(xiàn)相同的結(jié)果——組織中鐵的證明。

該程序包括 3 個基本步驟：

1. 組織切片用鹽酸處理以使含鐵血黃素分子的結(jié)合蛋白變性，從而釋放三價鐵 (3+) 離子。

2. 然后引入亞鐵氰化鉀。三價鐵離子與該溶液結(jié)合，形成亞鐵氰化鐵，這是一種不溶性的亮藍(lán)色顏料，也稱為普魯士藍(lán)。雖然鹽酸和亞鐵氰化鉀可以作為單獨(dú)的溶液引入，但現(xiàn)在大多數(shù)配方通常將它們結(jié)合使用。

3. 如果需要，PB 反應(yīng)之后可以進(jìn)行紅色復(fù)染，例如中性紅或番紅 O。

4. 因此，反應(yīng)的最終產(chǎn)物是組織切片中的鐵被視為藍(lán)色或紫色沉積物，而其他組織成分，如細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)，則被復(fù)染劑突出顯示為紅色。