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JC-1:超簡(jiǎn)單的線粒體膜電位檢測(cè)工具

2020-11-30 15:31 作者:艾美捷  | 我要投稿

JC-1 檢測(cè)線粒體膜電位(Membrane potential)原理:

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在細(xì)胞凋亡的過(guò)程中往往伴隨著線粒體跨膜電位的破壞,這被廣泛認(rèn)為是細(xì)胞凋亡過(guò)程中zui早發(fā)生的事件之一。線粒體膜電位的檢測(cè)有很多方法,JC-1的流式檢測(cè)是比較常見(jiàn)的一種方法。

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JC-1有單體和多聚體兩種存在狀態(tài),低濃度時(shí),以單體存在,可檢測(cè)到綠色熒光,用流式檢測(cè)時(shí),通常為FL-1通道(和FITC同通道)高濃度時(shí),以多聚體存在,可檢測(cè)到紅光,流式檢測(cè)通常為FL-2通道(和PE同通道)。因JC-1濃度的變化,在單體和多聚體之間形成一個(gè)可逆的轉(zhuǎn)變過(guò)程。

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正常細(xì)胞,膜電位正常時(shí),JC-1通過(guò)線粒體膜J性進(jìn)入線粒體內(nèi),并因濃度升高而形成發(fā)射紅色熒光的多聚體,而凋亡細(xì)胞,線粒體跨膜電位去J化,JC-1從線粒體內(nèi)釋放,濃度降低,逆轉(zhuǎn)為發(fā)射綠色熒光的單體形式。故而可以通過(guò)檢測(cè)綠色和紅色熒光來(lái)定性(細(xì)胞群的偏移)定量(細(xì)胞群的熒光強(qiáng)度)的檢測(cè)線粒體膜電位的變化。

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近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)線粒體功能狀態(tài)和不少疾病的密切相關(guān),多種細(xì)胞在不同因子作用下發(fā)生凋亡時(shí)均伴有MMP的下降,而檢測(cè)線粒體膜電位(MMP)的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)標(biāo)志性事件。

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如何快速檢測(cè)分析線粒體膜電位變化?

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我們可以通過(guò)JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測(cè)到細(xì)胞膜電位的下降,同時(shí)也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)。Abbkine線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-1)#KTA4001 就此提供了一種簡(jiǎn)單的方法,基于JC-1來(lái)檢測(cè)線粒體跨膜電位的變化,區(qū)分健康和凋亡細(xì)胞。在健康細(xì)胞中,這種染料在線粒體中積聚并聚集,在線粒體中形成明亮的紅色熒光團(tuán)塊。任何消除線粒體膜電位的事件都會(huì)阻止JC-1染料在線粒體中的積累,因此,染料以其單體形式保留在細(xì)胞質(zhì)中,導(dǎo)致紅色轉(zhuǎn)變(聚集的JC-1,Ex/Em = 585/590nm)至綠色熒光(JC-1單體,Ex/Em = 510/527nm)。

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JC-1可用作多種細(xì)胞類(lèi)型中線粒體潛力的指標(biāo),包括肌細(xì)胞和神經(jīng)元,以及完整組織和分離的線粒體。此線粒體膜電位分析試劑盒試劑盒含有CCCP,其引起質(zhì)子梯度的解偶聯(lián),降低線粒體電化學(xué)電勢(shì),可作為對(duì)照。

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線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-1)特點(diǎn):

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1.作為細(xì)胞健康的指標(biāo),檢測(cè)線粒體膜電位。

2.使用JC-1,一種熒光,親脂,陽(yáng)離子染料。

3.紅色熒光表示健康的線粒體,綠色熒光表明健康狀況不佳的線粒體。

4.針對(duì)流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡進(jìn)行了優(yōu)化。

5.含有CCCP(強(qiáng)效線粒體氧化磷酸化解偶聯(lián)劑)。

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使用Abbkine線粒體膜電位分析試劑盒(JC-1)分析Hela細(xì)胞。

A:膜電位正常的細(xì)胞(紅色);B:膜電位異常的細(xì)胞(綠色)

線粒體膜電位分析試劑盒 JC-1鏈接:

http://www.abbkine.cn/jc-1



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