背景概況

近年來，隨著細(xì)胞、基因治療類等生物制品快速發(fā)展，質(zhì)量控制（Quality Control；QC）受到了更廣泛的關(guān)注。以細(xì)胞治療類產(chǎn)品為例，整個(gè)生產(chǎn)過程都需要嚴(yán)格的QC檢測(cè)以保障終產(chǎn)品的質(zhì)量和安全。

（X. Dai et al,Biotechnology Advances. 26: 2018）

而目前大多新型生物制品由于其生命周期短等特點(diǎn)，一些傳統(tǒng)的檢測(cè)方法不能滿足其需求，因此各國(guó)陸續(xù)建議開發(fā)采用經(jīng)過驗(yàn)證的快檢方法，其中包括利用qPCR（Quantitative Real-time PCR）方法進(jìn)行藥物檢測(cè)，以保證藥物療效及質(zhì)量。

qPCR方法介紹

核酸檢測(cè)方法，特別是qPCR方法由于其靈敏度高、特異性強(qiáng)、檢測(cè)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用于生物制品質(zhì)量控制檢測(cè)中。生物制品（抗體/重組蛋白/疫苗等）質(zhì)量控制相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)主要包括了細(xì)菌、真菌、支原體檢測(cè)，宿主細(xì)胞核酸殘留、外源病毒、遺傳穩(wěn)定性、細(xì)胞鑒別等多方面內(nèi)容。QC實(shí)驗(yàn)室采用qPCR方法，需要建立完整的驗(yàn)證方案。驗(yàn)證方案應(yīng)包括對(duì)驗(yàn)證參數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)的評(píng)估，實(shí)現(xiàn)對(duì)方法的適用性及性能評(píng)估；當(dāng)驗(yàn)證參數(shù)符合預(yù)定的標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，該方法才可被接受并考慮進(jìn)一步驗(yàn)證。驗(yàn)證參數(shù)被分為兩組:方法接受參數(shù)（證明方法在此實(shí)驗(yàn)室條件下可接受）和方法性能參數(shù)（不同實(shí)驗(yàn)室間進(jìn)行評(píng)估），并需根據(jù)定量/定性試驗(yàn)類型確定驗(yàn)證參數(shù)。

qPCR方法一般需要經(jīng)過較復(fù)雜的樣品前處理和后續(xù)的核酸擴(kuò)增，該方法靈敏度高，易受實(shí)驗(yàn)操作、數(shù)據(jù)分析等外界因素的影響。以qPCR標(biāo)準(zhǔn)曲線?(Standard Curve)為例，進(jìn)行系統(tǒng)性介紹。

參考案例：

因此相較于培養(yǎng)法、免疫檢測(cè)法等其他檢測(cè)方法，qPCR方法對(duì)QC實(shí)驗(yàn)?zāi)芰μ岢隽烁蟮奶魬?zhàn)，特別是實(shí)驗(yàn)人員擴(kuò)增技術(shù)及數(shù)據(jù)分析的實(shí)驗(yàn)?zāi)芰τ葹橹匾?/p>

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