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必看!快速高通量RNA純化方法

2023-06-25 14:08 作者:分子科普小feng子  | 我要投稿

隨著各類型藥物研發(fā)的快速進(jìn)展,對高通量細(xì)胞RNA純化的需求逐漸增加。眾所周知,由于RNA分子的低穩(wěn)定性和RNA酶的豐富性,高通量提取RNA是一個比較復(fù)雜的過程,常規(guī)上需要儀器,成本較高。今天小優(yōu)給大家推薦一款快速且低成本、易于高通量的光速RNA純化試劑盒。

RNAGEM:溫度驅(qū)動,10min完成,多種樣本單管提取總RNA

RNAGEM是一種全核酸提取試劑盒,提供了一種從單個細(xì)胞到10w個細(xì)胞提取RNA的極其簡單的方法,適用于多種樣本如哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)物、激光捕獲顯微解剖和FACS制備的細(xì)胞群(如巨噬細(xì)胞)。

●?簡化的工作流程可在10分鐘內(nèi)完成RNA純化

●?在廣泛的細(xì)胞數(shù)量范圍內(nèi)以優(yōu)異的線性釋放RNA和DNA

●?無需進(jìn)一步純化RNA即可進(jìn)行準(zhǔn)確的RT-PCR和RT-qPCR分析,RT-PCR和RT-qPCR試劑可以直接添加到裂解物中,以在96孔板中實現(xiàn)簡單、精簡的方案

●?不含抑制劑意味著不需要苛刻的化學(xué)清洗或多個步驟

●?每個試劑盒包含RNAGEM酶、DNase I、緩沖液等。

RNAGEM工作流程

可根據(jù)實驗選擇是否使用DNase I去除DNA的影響。

RNAGEM極強的穩(wěn)定性與靈敏度

使用RNAGEM純化10–50000個Hela細(xì)胞中的RNA,將裂解產(chǎn)物5uL加入RT-qPCR試劑中。從個細(xì)胞中提取RNAGEM,并從高豐度mRNA(ACTB;?-actin)和低豐度mRNA(BRCA1)生成上圖,可以看到RNAGEM純化的RNA無抑制劑,且放大后有很好的平行性與梯度性。以及10個細(xì)胞獲得的圖證明了該方法的敏感性。

RNAGEM提取效率在10-100000個細(xì)胞的范圍內(nèi)是恒定的,且優(yōu)于Trizol方法的穩(wěn)定性。

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