自身免疫性甲狀腺炎動(dòng)物模型【動(dòng)物造?！?/p>

【造模機(jī)制】利用甲狀腺特有的自身抗原成分如甲狀腺球蛋白(TG),甲狀腺過氧化物酶(TPO),促甲狀腺激素受體(TSHR)等可不同程度地誘發(fā)出自身免疫性甲狀腺炎(auta-immune thyroiditis, AT)。其中 TG 可能是 AT 發(fā)生的主要自身抗原,其與弗氏完全佐劑聯(lián)合應(yīng)用可誘導(dǎo)免疫動(dòng)物發(fā)生實(shí)驗(yàn)性 AT。

高碘誘發(fā) AT 的原理為:①高碘對(duì)甲狀腺細(xì)胞具有直接損傷作用;②碘可與 TG 結(jié)合生成碘化 TG 而改變其分子構(gòu)象,使得 TG 原有的自然表位丟失,產(chǎn)生新的表位,從而提高了其抗原性:③碘誘使 MHCI抗原異常表達(dá),增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的功能及免疫細(xì)胞的攻擊性;④碘促進(jìn)免疫細(xì)胞產(chǎn)生某些細(xì)胞因子,誘使甲狀腺細(xì)胞 MHCII抗原異常表達(dá)和自身免疫性的產(chǎn)生。

【造模方法】雌性 Wistar 大鼠,5～6 周齡,體重120～140g。實(shí)驗(yàn)開始時(shí),給實(shí)驗(yàn)大鼠足墊部皮下注射弗氏完全佐劑乳化的牛甲狀腺球蛋白 100μg 作為初次免疫,分別于第 2 周,第 3 周、第 4 周以弗氏不完全佐劑乳化的牛甲狀腺球蛋白 100μg 加強(qiáng)免疫 1 次。實(shí)驗(yàn)大鼠飲用高碘水(含碘化鈉 500mg/L)。于第 6 周處死所有大鼠,制備血清,-20℃保存,放射免疫分析法檢測(cè)血清甲狀腺球蛋白抗體(TGAb),甲狀腺過氧化物酶抗體(TPOAb)。取甲狀腺組織,常規(guī)制備病理切片,進(jìn)行形態(tài)學(xué)檢查,包括濾泡大小、上皮形態(tài),上皮及濾泡間的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)程度。

【模型特點(diǎn)】

1.實(shí)驗(yàn)大鼠 TGAb、TPOAb 水平較正常大鼠明顯升高,且與甲狀腺淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)程度呈正相關(guān)關(guān)系。

2.正常大鼠甲狀腺濾泡呈中度大小,上皮細(xì)胞多呈立方狀,濾泡腔內(nèi)含豐富膠質(zhì);模型大鼠甲狀腺濾泡結(jié)構(gòu)中至重度破壞,淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)較為明顯。

【應(yīng)用范圍】本模型具有人類 AT 的大多數(shù)重要特征,適合于人類 AT 的致病機(jī)制及其防治措施等方面的研究。

【注意事項(xiàng)】AT 的發(fā)病機(jī)制至今尚不完全清楚,遺傳因素、性激素、細(xì)胞因子、藥物和環(huán)境因素對(duì) AT 的發(fā)生發(fā)展均有重要影響。在選擇構(gòu)建 AT 模型的方法時(shí),應(yīng)考慮到動(dòng)物種系、性別差異及飼料中的碘含量等問題。

【模型評(píng)估】本模型的構(gòu)建方法簡(jiǎn)單易行,有較高的成功率和可靠性,為深入研究 AT的致病機(jī)制及其防治措施提供了較滿意的工具。

近年來,許多研究者致力于 AT動(dòng)物模型的構(gòu)建,且已經(jīng)顯示了讓人鼓舞的結(jié)果。利用甲狀腺自身抗原成分如 TG、TPO 和 TSHR 單獨(dú)或加用佐劑來免疫動(dòng)物是經(jīng)典的造模途徑,在此基礎(chǔ)上還可以采用 TG 預(yù)刺激樹突狀細(xì)胞,以增強(qiáng)免疫反應(yīng)強(qiáng)度。BB 大鼠,Buffalo大鼠、NOD 小鼠、OS 雞,Beagle犬等種系動(dòng)物因自身遺傳缺陷可自發(fā)形成 AT,適用于遺傳因素對(duì) AT 影響的研究。而免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)和核酸免疫技術(shù)的問世,給 AT模型的構(gòu)建提供了更為廣闊的思路。

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