重組 DNA 是一種人工類型的 DNA，通過(guò)組合兩個(gè)或多個(gè)物種的 DNA 產(chǎn)生。 制造重組 DNA 的過(guò)程稱為分子克隆。 分子克隆的基本過(guò)程包括分離DNA、切割DNA、連接DNA和擴(kuò)增重組DNA。 將感興趣的基因插入載體中，該載體作為感興趣基因的載體分子。 該載體與感興趣的基因一起被稱為重組 DNA。 限制性內(nèi)切酶在基因克隆中的主要作用是切割 DNA。 使其適用于 DNA 操作的限制性內(nèi)切酶的關(guān)鍵特征是它們可以在特定目標(biāo)處切割 DNA。 這允許產(chǎn)生用于連接目的的所需DNA片段。

什么是限制性內(nèi)切酶？

限制性內(nèi)切酶是一種內(nèi)切酶，可識(shí)別稱為限制性內(nèi)切位點(diǎn)的短而特定的DNA序列，并在該位點(diǎn)切割DNA。它們是一種由細(xì)菌產(chǎn)生的生化剪刀。限制性內(nèi)切酶保護(hù)細(xì)菌免受噬菌體侵害。這些酶是從細(xì)菌中分離出來(lái)的，用于在實(shí)驗(yàn)室中切割DNA。限制性內(nèi)切酶的作用如圖所示。

限制性內(nèi)切酶在精確位置切割 DNA 的能力使研究人員能夠從基因組 DNA 中分離出含有基因的片段。 可以將這些片段插入載體以產(chǎn)生重組 DNA 分子。

限制性內(nèi)切酶如何用于制造重組DNA？

重組DNA是由兩個(gè)或兩個(gè)以上物種的DNA組成的DNA分子。它主要包括來(lái)自供體物種的感興趣的基因和將目的基因攜帶到宿主細(xì)胞的載體。生產(chǎn)重組DNA分子的主要步驟是DNA分離，用限制性內(nèi)切酶消化，將目的基因連接到載體上，以及擴(kuò)增宿主細(xì)胞內(nèi)的重組DNA分子。整個(gè)過(guò)程被稱為分子克隆。分子克隆如圖所示。