iTRAQ（isobaric tag for relative and absolute quantitation）蛋白質(zhì)組學(xué)即iTRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué)，是一種標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)，指利用iTRAQ標(biāo)記技術(shù)和質(zhì)譜技術(shù)對蛋白質(zhì)組進(jìn)行定量的一種分析方法。百泰派克生物科技提供基于質(zhì)譜的iTRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析服務(wù)。

iTRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)

iTRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué)是一種基于質(zhì)譜的定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)。iTRAQ全稱isobaric tag for relative and absolute quantitation，是AB SCIEX公司開發(fā)的一種多肽體外標(biāo)記技術(shù)。使用iTRAQ技術(shù)，可以輕松快速地通過質(zhì)譜實現(xiàn)復(fù)雜混合物中的蛋白質(zhì)的相對定量從而發(fā)現(xiàn)生物標(biāo)志物。iTRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)適用于無偏非靶向生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)。

iTRAQ定量蛋白組學(xué)原理和步驟

itraqiTRAQ試劑通常由一個N-甲基哌嗪報告基團(tuán)、一個平衡基團(tuán)和一個能與肽中的伯胺反應(yīng)的N-羥基琥珀酰亞胺酯基組成。其中，平衡基團(tuán)的作用是使每個樣品的標(biāo)記肽等壓，并且通過分析在質(zhì)譜儀中裂解后生成的報告基團(tuán)來進(jìn)行定量。不同樣品的標(biāo)記肽的報告基團(tuán)不同，不同報告基團(tuán)離子強(qiáng)度的差異代表了它所標(biāo)記的多肽的相對豐度。

iTRAQ定量蛋白組學(xué)采用鳥槍法的策略，首先使用酶將蛋白質(zhì)消化成肽段，再用iTRAQ試劑對肽段進(jìn)行差異標(biāo)記，然后將這些肽段混合后進(jìn)行串聯(lián)質(zhì)譜分析。該技術(shù)可實現(xiàn)多種不同來源樣品中蛋白質(zhì)的相對和絕對定量。