Fluo-4 AM 是一種常用的檢測細胞內 Ca2+ 濃度的探針。儲存方式：避光。

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　　NP細胞用5 μM Fura-4-AM在37°C的黑暗條件下孵育30分鐘。使用特定的Ca2+敏感熒光指示劑Fura-4-AM測量細胞內Ca2+水平，并通過熒光顯微鏡進行分析

　　生物活性

　　體外研究

　　fluo - 4am是一種熒光染料（λex=494 nm， λem=516 nm）。預加載fu -4 AM，觀察到非常明亮的熒光圖像。在裝載了氟-3 am的細胞的平行實驗中，得到的熒光圖像雖然在這種情況下清晰可辨，但亮度較低。指導方針（以下是我們推薦的方案。本協(xié)議僅提供了一個指南，應根據(jù)您的具體需求進行修改）。

　　1. 細胞計數(shù)，每個樣品取106個細胞（對照和實驗/秒）。

　　2. 收集細胞（5分鐘，3000×g, 4°C），在PBS中洗滌一次。

　　3.將細胞重懸于0.5 ml PBS中，加入0.5 μl Fluo-4-AM （1 mM原液）至終濃度為1 μM。37℃孵育1小時。

　　4. 用PBS洗滌細胞三次（2分鐘，3000×g），最后用1ml PBS重懸。分離成2根流式細胞儀管，每根0.5 ml。

　　5. 用流式細胞術評價染色結果，用CellQuest等軟件分析數(shù)據(jù)。

　　MCE尚未獨立證實這些方法的準確性。僅供參考。

　　通過酶切分離心肌細胞，并在37°C下負載Fluo 4-AM （5 μM） 20 min。用共聚焦顯微鏡記錄Fluo 4-AM在25°C下的熒光變化。

　　實驗參考方法?

　　細胞試驗? 參考來源：https://www.activeinhibitor.com/cck8/1127.html

　　為了測量懸浮細胞的熒光，將大鼠嗜堿性白血?。≧BL）細胞培養(yǎng)物的細胞稀釋至2至3×106。細胞懸浮于1 μM染料（包括fluo - 4am）中，37°C孵育30分鐘。然后將細胞懸浮液轉移到培養(yǎng)皿中，用熒光光譜儀測量熒光發(fā)射強度。

　　MCE尚未獨立證實這些方法的準確性。僅供參考。