CFDA-SE是細胞膜可滲透的，并且很容易在活細胞內(nèi)積聚，在那里它與細胞內(nèi)蛋白質(zhì)共價結(jié)合。 水解的 CFSE 發(fā)出綠色熒光，共價連接的熒光素分子不會從細胞中泄漏。 CFSE 標(biāo)記的細胞可以在體內(nèi)監(jiān)測數(shù)周。 因此，CFSE 可用于檢測活細胞以及通過熒光顯微鏡對細胞活動進行長期觀察。 CFSE 標(biāo)記細胞的激發(fā)和發(fā)射波長分別為 500 nm 和 520 nm。

圖1.CFSE 熒光光譜圖

在加入熒光探針CFDA SE后大約24小時，即可充分標(biāo)記細胞。被CFDA SE標(biāo)記的非分裂細胞的熒光非常穩(wěn)定，且CFDA SE標(biāo)記細胞的熒光非常均一；每分裂一次子代細胞的熒光會減弱一半，這樣通過流式細胞儀檢測就可以檢測出沒有分裂的細胞，分裂一次的細胞(1/2的熒光強度)，分離兩次的細胞(1/4的熒光強度)，分裂三次的細胞(1/8的熒光強度)以及類似的其它分裂次數(shù)的細胞。

圖2.人外周血淋巴細胞增殖。A-C: CFSE標(biāo)記的淋巴細胞（Day0, Day3, Day6）

——biofount范德生物（貨號：JT18976）