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Cytoskeleton / 艾美捷代理——FtsZ蛋白:大腸桿菌重組6xHis標記方案

2022-01-07 16:37 作者:艾美捷  | 我要投稿

FtsZ是一種細菌細胞骨架蛋白,對許多原核生物的細胞分裂至關重要?;诘托蛄型恍院腕@人的結構相似性,它已被證明是真核微管蛋白的細菌同源物。就像真核微管蛋白一樣,F(xiàn)tsZ以聚合依賴的方式聚合、結合和水解GTP。

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一起來看一下Cytoskeleton的FtsZ蛋白:大腸桿菌重組6xHis標記。

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Cytoskeleton

Cytoskeleton?專注于研究生物化學和細胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒。包括藥物篩選、信號轉導、蛋白質轉錄后修飾(PTM)、細胞骨架研究相關的系列試劑盒,尤其以細胞骨架相關研究見長,既能滿足于樣品較少的科學研究,也可以用于小規(guī)模篩選研究和高通量大規(guī)模篩選研究。此外,還有微管蛋白,肌動蛋白,小G蛋白,GAPs,GEFs等現(xiàn)有 藥物篩選服務。

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Cytoskeleton?/艾美捷?大腸桿菌FtsZ蛋白在大腸桿菌中過度表達后得到純化。E.c.FtsZ具有6xHis標簽,分子量約為45 kDa(下圖)。FTZ05作為凍干蛋白質提供,帶有緩沖液和穩(wěn)定劑。

在4-20%梯度SDS-PAGE凝膠上分離100μg大腸桿菌FtsZ蛋白樣品,并用考馬斯藍染色。通道1,100微克FTZ05。參見藍色分子量標記來自Invitrogen。

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FtsZ的生物活性可通過兩種方式確定,種是通過其在Mg2+和GTP存在下在體外高效聚合成原絲和原片的能力,第二種是將GTP水解成GDP和Pi。在擁擠試劑(例如“薄片緩沖液”中的碳水化合物聚合物Ficoll或葡聚糖)存在下與Mg2+:GTP進行聚合,形成以100000xg沉淀的FtsZ原絲薄片,通過蛋白質分析或SDS-PAGE對顆粒和sup進行分析,表明可聚合FtsZ蛋白質的比例;當造粒量大于總蛋白質的60%,且上清液蛋白質與其已知的組裝臨界濃度一致時,該批次蛋白質通過質量控制。GTPase活性在“原絲緩沖液”中通過使用MESEG磷酸鹽檢測試劑盒(Cat#BK052)或終點分析(Cat.#BK054)測量隨時間釋放的Pi來確定。當在原絲緩沖液中獲得大于0.05 mol GTP/mol FtsZ/min的比活性時,該批次蛋白質通過質量控制。

Cytoskeleton?相關研究:

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名稱???????????cat# ??????規(guī)格

微管蛋白(純度>99%):豬腦 ???T240-A ????1x1mg

微管結合蛋白自旋下降分析生物化學試劑盒???BK029 ??50-100 assays

普通微管蛋白緩沖液:1x儲備 ??BST01-001 ?1x10ml

微管蛋白甘油緩沖液:緩沖液??BST05-001 ?1x10ml

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Cytoskeleton主要覆蓋肌動蛋白,微管蛋白,馬達蛋白,小G蛋白,細胞外基質,活細胞成像等相關領域,提供對應的蛋白質,抗體,檢測與分析試劑盒等等。

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艾美捷科技是Cytoskeleton的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質的產品與服務。


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