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艾美捷?;罨鞍證(BCAPC-1080)解決方案

2023-07-03 15:52 作者:艾美捷  | 我要投稿

牛活化蛋白C背景:

活化蛋白C(APC)是一種抗凝血絲氨酸蛋白酶,來源于雙鏈維生素K依賴性酶原蛋白C。α-凝血酶和凝血調(diào)節(jié)蛋白之間的復合物催化蛋白C重鏈中Arg-12(牛中的?Arg-14)的單次切割,以生成APC。幾種非生理相關(guān)的蛋白酶,如RVV-X激活劑、胰蛋白酶和PROTAC也能夠激活蛋白C。APC作為抗凝劑起作用,催化輔助因子、因子Va和VIIIa的蛋白水解失活,從而抑制凝血酶原和Xase因子復合物。因子?Va和VIIIa的失活依賴于Ca2+和磷脂。維生素K依賴性輔助因子蛋白S通過與APC形成1:1復合物(Kd=6x10-9M)適度增加這種失活率。有幾個因素會減弱?APC?的抗凝血活性。因子Xa通過競爭因子Va上的相似結(jié)合位點來保護因子Va免受APC的蛋白水解作用。凝血酶也被提議通過蛋白S的蛋白水解失活來調(diào)節(jié)?APC。依賴性蛋白C抑制劑?(PAI-3)、循環(huán)肝素非依賴性蛋白C抑制劑、血小板衍生蛋白C抑制劑和PAI-1。據(jù)報道,APC與兩種類型的?PAI之間形成的復合物可解釋輸注APC或體內(nèi)APC生成時觀察到的纖維蛋白溶解增加。也可以使用氯甲基酮。活化的C蛋白是通過用凝血酶活化然后通過離子交換層析從純化的C蛋白制備的。APC以50%(體積/體積)甘油/水的形式提供,應儲存在-20°C下。通過?SDS-PAGE?分析確定純度,并使用顯色底物測定法測量活性。根據(jù)APC抗性測定的要求,還測試了所有?APC?生產(chǎn)批次延長正常人血漿?aPTT?的能力。該測試的結(jié)果以aPTT (+/- APC)比率(10nM APC)?的形式提供給每批次。

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艾美捷?;罨鞍證#BCAPC-1080參數(shù):

本地化:等離子

作用方式:抗凝,滅活因子Va和VIIIa

分子量:56200(人)(5)

52650(牛)(5)

56200(鼠)-根據(jù)人類價值推斷

消光系數(shù):E1 cm,280 nm=14.5(人)(5)

=13.7(牛)(5)

=14.5(鼠)-根據(jù)人類價值推斷

等電點:4.4-4.8(人)(9)

4.2-4.5(牛)(9)

結(jié)構(gòu):兩條鏈,Mr=35000和21000,二硫鍵連接,

NH2-末端gla結(jié)構(gòu)域兩個EGF結(jié)構(gòu)域

碳水化合物百分比:23%(人體)(5)

14%(牛)(5)

翻譯后修飾:11個gla殘基(牛),

一種β-羥基天冬氨酸

免費熒光基質(zhì):HTI目錄號SN-54和SN-59

?

?;罨鞍證文獻參考:

1 . ?Kalafatis, M ., and Mann, K .G ., J . Biol . Chem ., 268, 27246 (1993) .

2 . ?Kalafatis, M ., et al., J . Biol . Chem ., 269, 31869 (1994) .

3 . ?Esmon, C .T ., Progress in Thromb . and Hemostas ., 10, 25 (1984) .

4 . ?Esmon, C .T ., J . Biol . Chem ., 264, 4743 (1989) .

5 . ?Kisiel, W ., et al., Methods Enzymol ., 80, 320 (1981) .

6 . ?Stenflo, J ., Semin . in Thromb . and Hemostas ., 10, 109 (1984) .

7 . ?Marlar, R .A ., Semin . in Thromb . and Hemostas ., 11, 387 (1985) .

8 . ?Walker, F .J ., et al., J . Biol . Chem ., 256, 11128 (1981) .

9 . ?Discipio, R .G ., et al., Biochemistry, 18, 899 (1979) .

10 . Dahlback, B ., and Hildebrand, B ., Proc . Natl . Acad . Sci . USA, 91, 1396 (1994) .

11 . ?Svensson, P .J ., and Dahlback, B ., New Engl . J . Med ., 330, 517 (1994) .


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