JC-10 熒光原理

JC-10 是 JC-1 的優(yōu)越替代品。與JC-1?相比，JC-10 具有更好的水溶性。JC-10 可檢測細(xì)胞、組織以及純化的線粒體膜電位。當(dāng)線粒體膜電位較高的情況下，JC-10 聚集在線粒體的基質(zhì)中，形成聚合物，可以發(fā)出紅色的熒光；當(dāng)線粒體膜電位較低情況下，JC-10 不能聚集在線粒體的基質(zhì)中，此時(shí) JC-10 作為單體，可以發(fā)出綠色熒光。 JC-10 能夠選擇性地進(jìn)入線粒體，并隨著膜電位的增加可逆地將其顏色從綠色變?yōu)槌壬晒?:λex 510 nm, λem 525 nm。

在正常細(xì)胞中，JC-10濃縮在線粒體基質(zhì)中，形成紅色熒光聚集體。然而，在凋亡和壞死細(xì)胞中，JC-10以單體形式存在并將細(xì)胞染成綠色。綠色發(fā)射可以在熒光通道1（FL1）中分析，綠橙色發(fā)射可以在通道2（FL2）中分析。除了用于熒光微孔板平臺(tái)外，它還可用于熒光成像和流式細(xì)胞術(shù)。

使用案例

凋亡誘導(dǎo)劑喜樹堿誘導(dǎo) Jurkat 細(xì)胞：0、2uM、5uM

用JC-10和JC-1在Jurkat細(xì)胞中測量喜樹堿誘導(dǎo)的線粒體膜電位變化。

用喜樹堿（10μM）處理Jurkat細(xì)胞4小時(shí)后，將JC-1和JC-10染料負(fù)載溶液加入孔中并孵育30分鐘。使用酶標(biāo)儀在Ex / Em = 540/590 nm和490/525 nm下測量JC-1和JC-10的J聚集體和單體形式的熒光強(qiáng)度。