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PLoS Biology:新的小型CRISPR/Cas9工具-源井生物

2020-07-10 09:28 作者:源井生物  | 我要投稿

研究者開發(fā)出了一個新的小型CRISPR/Cas9工具,具有活性高(和SaCas9相當(dāng))、編輯范圍大的優(yōu)點。該Cas9來源于耳氏葡萄球菌(Staphylococcus auricularis),被命名為SauriCas9,識別NNGG PAM序列,編輯范圍與常用的SpCas9一樣。

SpCas9是最常用的基因編輯工具,具有活性高、編輯范圍大的優(yōu)點(識別NGG PAM)。但是SpCas9比較大,不能被包裝到AAV病毒中用于基因治療。隨后科研人員開發(fā)出了幾個小型CRISPR/Cas9工具,能夠被包裝到AAV病毒中。其中SaCas9活性較高,但是編輯范圍小(識別NNGRRT PAM)。其它幾個小型CRISPR/Cas9活性偏低。

近期,復(fù)旦大學(xué)王永明課題組聯(lián)合復(fù)旦大學(xué)王紅艷課題組在PLOS Biology上在線發(fā)表了題為“A compact Cas9 ortholog from staphylococcus auricularis (SauriCas9) expands the DNA targeting scope”的研究論文。研究者開發(fā)出了一個新的小型CRISPR/Cas9工具,具有活性高(和SaCas9相當(dāng))、編輯范圍大的優(yōu)點。該Cas9來源于耳氏葡萄球菌(Staphylococcus auricularis),被命名為SauriCas9,識別NNGG PAM序列,編輯范圍與常用的SpCas9一樣。

SauriCas9通過AAV病毒包裝后,在多種細(xì)胞類型中實現(xiàn)了基因編輯(圖),說明SauriCas9具有用于基因治療的潛力。


此外,研究者還把SauriCas9與脫氨酶融合,制作了兩種新的堿基編輯器,本別是SauriBE4max和SauriABEmax,可以實現(xiàn)C-T或者A-G兩種堿基轉(zhuǎn)換。

參考文獻(xiàn):

1.Jinek M, Chylinski K, Fonfara I, Hauer M, Doudna JA, Charpentier E. A programmable dual-RNA-guided DNA endonuclease in adaptive bacterial immunity. Science. 2012;337(6096):816-21.

2.Wu Z, Yang H, Colosi P. Effect of genome size on AAV vector packaging. Molecular therapy : the journal of the American Society of Gene Therapy. 2010;18(1):80-6.

3.Ran FA, Cong L, Yan WX, Scott DA, Gootenberg JS, Kriz AJ, et al. In vivo genome editing using Staphylococcus aureus Cas9. Nature. 2015;520(7546):186-91.

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