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自身炎癥性免疫動物模型【疾病動物模型】

2022-08-15 17:02 作者:吉田bio  | 我要投稿

自身炎癥性免疫動物模型【疾病動物模型】

自身免疫病是臨床免疫病的重要組成部分。自身免疫動物模型(animal model of auto-immune diseases)對澄清自身免疫反應(yīng)的發(fā)病機(jī)制有重要意義。

【造模機(jī)制】CJ-S131菌體抗原輔以佐劑免疫小鼠,由于細(xì)菌持續(xù)釋放CJ-S131菌體抗原,反復(fù)刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng),可誘導(dǎo)產(chǎn)生抗ds-DNA和 Ss-DNA自身抗體,亦能使T、B細(xì)胞的反應(yīng)性增強(qiáng),在肝、腎、腸等組織產(chǎn)生炎癥性病理損傷。

【造模方法】選用純品系小鼠。儀器藥品:酶標(biāo)儀、分光光度計、CJ-S131菌、弗氏完全佐劑等。

模型制作:

1.CJ-S31抗原制備 用含0.3%的甲醛生理鹽水,洗下瓊脂板上培養(yǎng)24小時的CJ-S31菌苔,用生理鹽水稀釋,400r/min,離心30分鐘,棄上清液,加生理鹽水混成懸液,在分光光度計540nm波長下,將細(xì)菌懸液調(diào)OD值為1.25。

2.免疫小鼠 取細(xì)菌懸液與等量弗氏完全佐劑混勻,完全乳化后,取50μ1給小鼠注射,免疫后第15天,取OD值1.25的細(xì)菌懸液0.2ml,給小鼠靜脈注射,加強(qiáng)免疫一次。小鼠致敏后4周,測血清抗體,抗體生成細(xì)胞(PFC)和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化,同時取肝、腎、腸等組織做病理學(xué)檢查。

3.模型檢測 用 ELISA方法測定小鼠血清中抗 ds-DNA和抗ss-DNA自身抗體。

【模型特點(diǎn)】免疫小鼠1個月,小鼠血清中抗 ds-DNA和 ss-DNA抗體水平明顯升高;脾細(xì)胞的PFC值明顯升高;在ConA刺激或無有絲分裂原作用的條件下,淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率明顯升高。在肝臟有散在的炎性細(xì)胞浸潤灶,浸潤細(xì)胞以中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞為主,庫普弗細(xì)胞明顯增生。在腎臟,腎小球系膜細(xì)胞明顯增生,腎小管上皮細(xì)胞有濁腫樣變性。在腸道可見大量的炎性細(xì)胞浸潤,腸上皮細(xì)胞有明顯的增生。

【注意事項】細(xì)菌懸液與等量弗氏完全佐劑混勻,應(yīng)完全乳化后再免疫。否則免疫效果不好。

【應(yīng)用范圍】該模型對澄清自身免疫反應(yīng)的發(fā)病機(jī)制有重要意義。

文章轉(zhuǎn)載于北京吉田生物科技有限公司?可承接動物實驗外包


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