活性氧檢測分析：總ROS熒光法檢測試劑盒
活性氧（ROS）是生物有氧代謝過程中的副產(chǎn)品，包括氧離子，過氧化物和含氧自由基等。下面給大家介紹一下活性氧檢測工具。
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Cell Meter檢測試劑盒是一類用于檢測細(xì)胞功能的系列工具，包括細(xì)胞活性、細(xì)胞毒性、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞膜電位以及細(xì)胞周期等方面的指標(biāo)。每種檢測方案均能提供不同熒光顏色的檢測方案。這些高效的檢測方案為從多角度研究細(xì)胞功能活動提供了一種十分有效的方法?；钚匝醴肿樱≧OS）是氧正常代謝過程的固有副產(chǎn)品，在細(xì)胞信號及轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中扮演著重要的角色。然而，在氧化應(yīng)激階段，ROS水平顯著增加。ROS的積聚導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)的重大破壞。氧化應(yīng)激通常在心血管疾病，糖尿病，骨質(zhì)疏松，中風(fēng)，炎癥以及許多神經(jīng)變性疾病和癌癥中被被發(fā)現(xiàn)。ROS的測定能幫助我們理解氧化應(yīng)激如何調(diào)節(jié)改變的胞內(nèi)途徑。
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艾美捷總ROS檢測試劑/試劑盒可以檢測活細(xì)胞中總的ROS，它與ROS反應(yīng)時，會產(chǎn)生熒光。
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圖1.?用Cell Meter?熒光法細(xì)胞內(nèi)總ROS活性測定試劑盒（cat#?AAT-22900）檢測HeLa細(xì)胞中的ROS。將HeLa細(xì)胞以15,000個細(xì)胞/ 90 uL /孔在Costar黑色/透明底部96孔板中過夜接種。將細(xì)胞未經(jīng)處理（對照）或在37°C下用1 mM H2O2或100 uM叔丁基氫過氧化物（TBHP）處理30分鐘。加入ROS Brite 670工作溶液（100 uL /孔），并在5％CO2和37°C的培養(yǎng)箱中孵育1小時。使用FlexStation（Molecular Devices）以底部讀取模式在Ex / Em = 650/675 nm（cut off= 665 nm）處檢測熒光信號。
圖2.?在Costar黑色/透明底部96孔板中，用Cell Meter?熒光法細(xì)胞內(nèi)總ROS活性測定試劑盒染色的Hela細(xì)胞圖像。A：未經(jīng)處理的對照細(xì)胞。?B：細(xì)胞在染色前用100 uM氫過氧化叔丁基（TBHP）處理30分鐘。
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圖3. ROS Brite 700對PBS緩沖液（pH 7.2）中不同活性氧的熒光響應(yīng)。用Ex / Em?＝?670 / 700nm測量熒光強(qiáng)度。
