Sulfo-CY7 NHS ester是一種水溶性的生物分子標(biāo)記劑，通常用于將其共價連接到生物分子上，以實現(xiàn)熒光標(biāo)記和成像。以下是使用Sulfo-CY7 NHS ester進(jìn)行水溶性生物分子標(biāo)記的一般步驟：

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1. 制備目標(biāo)生物分子：準(zhǔn)備要標(biāo)記的生物分子，如蛋白質(zhì)、抗體、核酸、多肽或其他分子。確保生物分子具有可供連接的氨基官能團(tuán)，通常是賴氨酸殘基、N-末端的氨基酸或其他氨基官能團(tuán)。

2. 制備Sulfo-CY7 NHS ester溶液：制備Sulfo-CY7 NHS ester的溶液，通常使用有機(jī)溶劑（如二甲基亞酰胺）或適當(dāng)?shù)木彌_液。確保Sulfo-CY7 NHS ester在溶液中完全溶解。

3. 活化Sulfo-CY7 NHS ester：向Sulfo-CY7 NHS ester溶液中添加適當(dāng)?shù)幕罨噭?，如DCC或EDC，以激活NHS ester官能團(tuán)。

4. 連接Sulfo-CY7 NHS ester：將激活的Sulfo-CY7 NHS ester與目標(biāo)生物分子混合，并在堿性條件下（通常在pH約8-9）進(jìn)行反應(yīng)。在這種條件下，NHS ester官能團(tuán)與生物分子上的氨基官能團(tuán)發(fā)生酰胺鍵的反應(yīng)，形成共價連接。

5. 反應(yīng)停止：反應(yīng)通常在一定時間后停止，通常通過添加中和劑（如氨水或丙二醇）來中和反應(yīng)中的未反應(yīng)Sulfo-CY7 NHS ester。

6. 純化：反應(yīng)混合物通常需要進(jìn)行純化，以去除未反應(yīng)的Sulfo-CY7 NHS ester和其他雜質(zhì)。通常使用凝膠過濾色譜、高效液相色譜（HPLC）或其他純化方法。

7. 驗證：使用光譜學(xué)技術(shù)，如紫外-可見吸收光譜、熒光光譜以及質(zhì)譜分析，來驗證成功的連接。

8. 應(yīng)用：使用標(biāo)記后的生物分子進(jìn)行各種生物醫(yī)學(xué)研究，包括細(xì)胞成像、流式細(xì)胞儀分析、免疫熒光分析、生物傳感和分子探針開發(fā)等應(yīng)用。

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Sulfo-CY7 NHS ester的水溶性和近紅外熒光特性使其成為生物標(biāo)記和成像的選擇，特別是在需要深層組織成像和背景噪聲最小化的情況下。

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CY7 maleimide

ICG-Biotin

Sulfo-CY3 maleimide

Sulfo-CY7 NHS ester

FITC-dextran

HSA-FITC

CY7 NHS ester

CY5 NHS ester

CY3 COOH

FITC-PEG-MAL

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