交聯(lián)蛋白質(zhì)的方法(含巰基)：

為了形成蛋白A-NH2和蛋白B-SH的交聯(lián)，蛋白A-NH2用SPDP試劑進(jìn)行修飾，然后脫鹽除去反應(yīng)副產(chǎn)物和過(guò)量的未反應(yīng)試劑，純化SPDP修飾的蛋白A-NH2，接著加入含巰基的蛋白B-SH來(lái)制備交聯(lián)物

1.需要材料:水混溶性有機(jī)溶劑如二甲基亞砜（DMSO）或二甲基甲酰胺（DMF），不需要Sulfo-LC-SPDP;含EDTA的磷酸鹽緩沖液（PBS-EDTA）：100mM磷酸鈉，150mM NaCl，1mM EDTA，0.02%疊氮化鈉，pH7.5;脫鹽柱，足以處理1～2mL樣品;待交聯(lián)的蛋白質(zhì)：IgG和β-半乳糖苷酶分別代表含有胺基和巰基的蛋白質(zhì)。

2.程序:打開(kāi)SPDP試劑瓶前先平衡至室溫;立即使用前，準(zhǔn)備20mM SPDP試劑溶液將2mg試劑溶于320μlDMSO或DMF中;溶解2～5mg IgG在1.0mL PBS-EDTA中，加入25μL 20mM SPDP溶液;室溫下孵育30分鐘;用PBS-EDTA平衡的脫鹽柱純化SPDP修飾的IgG，去除反應(yīng)副產(chǎn)物和過(guò)量的未反應(yīng)的SPDP試劑;向IgG溶液中加入1～3mg β-半乳糖苷酶（β-gal/IgG摩爾比約1～3），并將反應(yīng)混合物在室溫下孵育過(guò)夜。蛋白質(zhì)（本示例中的IgG和β-半乳糖苷酶）已交聯(lián)。

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產(chǎn)品名稱(chēng)：水溶性SPDP、磺化SPDP-多肽

狀態(tài)：固體/粉末/溶液

產(chǎn)品規(guī)格：mg

保存：冷藏

儲(chǔ)藏條件：-20℃

儲(chǔ)存時(shí)間：1年

用途：科研

溫馨提醒：僅供科研，不能用于人體實(shí)驗(yàn)

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產(chǎn)品名稱(chēng)：4-馬來(lái)酰亞胺基丁酸-N-羥基琥珀酰亞胺酯

狀態(tài)：固體/粉末/溶液

產(chǎn)品規(guī)格：mg

保存：冷藏

儲(chǔ)藏條件：-20℃

儲(chǔ)存時(shí)間：1年

用途：科研

溫馨提醒：僅供科研，不能用于人體實(shí)驗(yàn)

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相關(guān)產(chǎn)品：

EMCS交聯(lián)劑

PNPP交聯(lián)劑

IPTG交聯(lián)劑

磺基-SMCC鈉鹽

SPDP-巰基-馬來(lái)酰亞胺

Sulfo-Lc-SPDP-GFOGER

瑞禧WFF.2022.12