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坐骨神經(jīng)模型|動物模型構(gòu)建|坐骨神經(jīng)慢性縮窄性損傷(CCI)模型

2023-03-21 09:47 作者:小愛說藥  | 我要投稿

CCI模型是用鉻制羊腸線環(huán)扎坐骨神經(jīng)干制作而成,羊腸線遇水膨脹,對神經(jīng)形成慢性束縛性損傷,導致部分神經(jīng)纖維變性壞死;另一方面CCI模型引起的疼痛還與此種可吸收線分解產(chǎn)物引起的炎性刺激有關,因此CCI模型引起的疼痛受兩方面因素的影響,作用機制較為復雜。

建模方法:

1.手術器械消毒,結(jié)扎線消毒;

2.大鼠麻醉后,一側(cè)后肢剃毛,消毒;

3.剪刀沿坐骨剪開一個1cm左右的開口,分離筋膜;鈍性分離肌肉,使坐骨神經(jīng)主干暴露于視野;

4.用玻璃分針挑出坐骨神經(jīng)主干,玻璃分針輔助穿線,對坐骨神經(jīng)進行4道結(jié)扎,間隔1mm,力度以結(jié)扎第一道時動物腳趾輕微抖動為宜;

5.結(jié)扎后對皮膚進行縫合,消毒。


檢測方法和結(jié)果:

機械痛測定方法(Ascending測試法)

1.將試驗動物放置在機械痛金屬網(wǎng)架上靜置30 min-1 h,待動物不再張望、探究、較安靜后開始測試;

2.試驗動物安靜后用Von-Frey纖維絲緩慢輕柔的刺激待測后肢足底使纖維絲彎曲,持續(xù)2-3s觀察動物縮足反應。按照纖維絲克數(shù)從小到大的順序逐一刺激受試動物,每一個克數(shù)的纖維絲連續(xù)刺激5次,每次刺激間隔至少10s。若出現(xiàn)的陽性反應小于3次,則使用較大一級的纖維絲重復上述操作,當測試第一次出現(xiàn)3次或3次以上的陽性反應,則該纖維絲為該動物的疼痛閾值(每只動物測2次測試,取其平均值)。

3.動物若由于刺激而出現(xiàn)抬足、躲避或舔足動作反應,則標記為陽性(×),由于身體活動而引起的縮足反應則不算在內(nèi);若沒有上述表現(xiàn),則標記為陰性(О)。

4.纖維絲克數(shù):Mouse(g): 0.16、0.40、0.60、1.0、1.4、2.0切斷值為2.0g;Rat(g): 0.60、1.0、1.4、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、15.0切斷值為15.0g。


熱板法:

1.將試驗動物放置在測試室適應15-30min;

2.儀器準備:將熱板溫度調(diào)定52.5℃(用于大鼠,小鼠55℃);

3.將動物放到熱板上觀察該動物,直到它表現(xiàn)出傷害性反應,例如舔爪子、跺腳、跳躍和逃離熱板(每只測試兩次,間隔至少10min);

4.將動物從熱板中取出,記錄其反應的時間。對于在截止時間之前沒有反應的動物,記錄截止時間(30s);

5.篩選出痛閾為10-30秒的實驗動物。




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