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艾美捷Transcreener ADP 2激酶檢測試劑盒的操作方式及應(yīng)用特征

2023-06-26 16:00 作者:認(rèn)真搞科研的科研達(dá)人  | 我要投稿

Transcreener?是通用的——幾乎可以與任何激酶一起使用

通過使用一套檢測不變產(chǎn)物?ADP?的試劑,克服了對酶家族中單個(gè)成員進(jìn)行耗時(shí)、一次性開發(fā)的需求。該測定可用于幾乎任何底物,包括肽底物、蛋白質(zhì)底物和脂質(zhì)底物。示例酶靶標(biāo)包括:蛋白激酶,脂質(zhì)激酶,碳水化合物激酶,ATP酶,伴侶蛋白,核苷酸酶,羧化酶,解旋酶等。禮來?(Eli Lilly)?使用?Transcreener?發(fā)現(xiàn)Aurora A激酶抑制劑并為癌癥治療開發(fā)申請專利。輝瑞使用該檢測方法發(fā)現(xiàn)乙酰輔酶?A?羧化酶抑制劑作為治療糖尿病和代謝綜合征等多種適應(yīng)癥的潛在療法。

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艾美捷Transcreener ADP 2激酶檢測試劑盒#BBK-3011-1K依賴于使用專有抗體直接檢測?ADP,該抗體與?ADP?具有極高的特異性和親和力,與?ATP?的交叉反應(yīng)性可忽略不計(jì)。這種出色的選擇性允許在存在過量?ATP?的情況下直接檢測?ADP,這是在初始速度條件下(例如,≤10% ATP?消耗)運(yùn)行的激酶活性測定的要求。ADP?抗體的高親和力意味著該測定法對低至?10 nM?且?Z'?值為?0.7?或更大的?ADP?具有穩(wěn)健檢測的靈敏度,因此您可以使用更少的珍貴酶。

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Transcreener ADP 2激酶檢測試劑盒如何工作?

1.通過使用跨篩選器?ADP?直接測量酶形成的?ADP?來確定激酶活性2測定。通過檢測ADP輸出,該測定提供了一種通用方法來實(shí)時(shí)評估任何產(chǎn)生ADP的酶的活性。

2.Transcreener激酶測定技術(shù)使用一種簡單但高效的方法,該方法由對ADP具有ATP選擇性的抗體和遠(yuǎn)紅熒光示蹤劑組成。反應(yīng)中產(chǎn)生的ADP與示蹤劑競爭,改變熒光特性并提供熒光讀數(shù)。

3.激酶檢測試劑盒可與?FP、FI?和?TR-FRET。這是一種簡單的混合和讀取格式。進(jìn)行酶反應(yīng),添加檢測試劑并測量。該系統(tǒng)的簡單性產(chǎn)生了強(qiáng)大的結(jié)果,這也使其對HTS非常友好。

應(yīng)用:

測量激酶的酶活性

用于激酶調(diào)節(jié)劑的篩選化合物庫

量化抑制劑效力

抑制劑選擇性分析

測量藥物靶標(biāo)停留時(shí)間

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特征:

直接檢測未標(biāo)記的?ADP

易于使用、均勻、一步式

初始速度條件下的穩(wěn)健檢測?Z' > 0.7

遠(yuǎn)紅熒光讀數(shù)將化合物干擾降至最低

安全、無放射性的方法

適用于?0.1?至?1000?μM?的?ATP?濃度

提供?FP、FI?或?TR-FRET?讀數(shù)

可在連續(xù)或端點(diǎn)模式下使用


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