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Cy3-maleimide是一種熒光染料分子探針，可以用于標記含有巰基（-SH）的生物分子，特別是蛋白質和其他高分子。

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巰基（-SH）與Cy3-maleimide的Maleimide官能團發(fā)生特異性的共價加成反應，形成巰基-馬來酰亞胺（Maleimide-thiol）結構。這種反應是高度特異性的，幾乎不與其他生物官能團發(fā)生反應，因此可以實現對含有巰基的生物分子的選擇性標記。

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以下是Cy3-maleimide標記帶巰基反應的蛋白和高分子的步驟：

1. 制備樣品：首先需要獲得含有巰基的蛋白質或高分子樣品。這些樣品可以是純化的蛋白質或合成的含有巰基的多肽或高分子。

2. 選擇合適的緩沖液：在進行標記反應前，選擇合適的緩沖液使蛋白質或高分子處于適當的pH條件和穩(wěn)定的狀態(tài)。

3. 加入Cy3-maleimide：將Cy3-maleimide溶解在適當的有機溶劑（如DMSO）中，然后加入到樣品中，使其與含有巰基的生物分子發(fā)生反應。

根據具體的實驗條件，進行適當的反應時間和溫度。通常，反應在室溫下進行，反應時間一般為30分鐘至1小時。

5. 反應停止：反應完成后，可以添加還原劑（如巰基乙醇）來停止反應，并消除未反應的Cy3-maleimide。

6. 純化：為了去除未反應的Cy3-maleimide和其他雜質，可以進行樣品的純化步驟，如凝膠過濾、凝膠電泳等。

7. 驗證標記：使用熒光分光光度計或其他熒光成像系統(tǒng)，確認Cy3-maleimide是否成功地標記了蛋白質或高分子。

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需要注意的是，Cy3-maleimide標記對于含有巰基的生物分子是高度特異性的，但為了確保標記的質量和特異性，最好在實驗前進行對照實驗，并對標記后的樣品進行驗證。

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BSA-FITC

HSA-FITC

FITC-dextran

ICG-DBCO

Sulfo-CY3 NHS ester

CY3 hydrazide

Sulfo-CY5 maleimide

Sulfo-CY5.5 NHS ester

CY7 NHS ester

Sulfo-CY3.5 NHS ester

CY5 NHS ester

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