XinBio人淋巴細(xì)胞分離液是葡聚糖和液影酸鈉混合液達(dá)到特定的比重，通過離心分層獲得純化的單核細(xì)胞淋巴細(xì)胞。

分離原理：血液中單獨(dú)核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，其容積、形狀和溶解度與別的細(xì)胞不一樣，淋巴細(xì)胞分離液是某種密度接近1.075∽1.090 之間而近似于等滲的溶液，用它 做密度梯度離心，使一定密度的細(xì)胞按相對密度梯度分布，進(jìn)而將各類血細(xì)胞多方面分離。

成份：主要為多聚糖，泛影酸鈉

形狀：本品為透明澄清液體，微乳光，無肉眼可見不溶物

密度：1.077±0.001g/mL?

滲透壓：290±15mOsm

用途：用于分離提取人外周血或臍帶血中的單個(gè)核細(xì)胞

貯藏條件及有效期：?4-30°C 避光保存，禁止凍存。有效期24個(gè)月。

使用時(shí)的短暫光照對本品的影響可忽略不計(jì)，但在每次使用后，應(yīng)盡快放回避光處保存。

產(chǎn)品貨號

貨號

名稱

規(guī)格

91-01-0001

人淋巴細(xì)胞分離液

200 ml/瓶

使用方式

1.?將分離所用的緩沖液與本品均恢復(fù)至室溫。

2.?用離心管收集血液，并與等量的生理鹽水，Hanks 液或不含鈣鎂的PBS 混勻（血液不稀釋亦可）。

3.?取15mL 離心管，加入3mL 本品，并將2 步驟中的稀釋血液緩緩鋪加到本品的上層。注意：鋪加血樣時(shí)建議速度適中，尤其是剛開始時(shí)的鋪加， 避免破壞淋巴細(xì)胞分離液與血樣的界面。

4.?室溫下，800g 離心20min。

5.?離心后，離心管由上到下分為4 層：血漿層-白膜層-人淋巴細(xì)胞分離液層-紅細(xì)胞與粒細(xì)胞的沉淀。不用 棄去上層液體， 用巴斯德管小心吸取白膜層至另一新的離心管中。

注意：由于樣本之間的差異，有的血樣離心后，仍有部分的紅細(xì)胞以及粒細(xì)胞殘留在分離液層中，無法沉淀 完全，因此用巴斯德管吸取白膜層的細(xì)胞時(shí)，盡量少吸取到分離液層中的液體。

6.?用10mL生理鹽水，Hanks 液或不含鈣鎂的PBS重懸獲得的PBMC，300g，離心10min。

7.?重復(fù)操作步驟 6 一次，沉淀即為 PBMC。

注意事項(xiàng)

1.?本品對光敏感，將本品持續(xù)暴露在光照中會使泛影酸鈉中的碘離子分離，影響分離效果，但日常 的使用過程中，這種影響可忽略不計(jì)。

2.?若本品儲存于冰箱中，那么需將本品恢復(fù)至室溫后使用。

3.?血樣的新鮮程度與分離效果關(guān)系密切，為了獲得最佳的分離效果與細(xì)胞活性，最好在取血后2h 內(nèi)進(jìn)行分離操作，血樣的存放時(shí)間越長，分離效果越差。

4.?由于樣本之間的差異，為了獲得最佳的分離效果，可能需要調(diào)整離心力與離心時(shí)間，但通常離心 力最大不超過1000g。