FITC-conjugated Streptavidin，關(guān)于鏈霉親和素偶聯(lián)物 FITC-標(biāo)記的方法

今天小編整理并分享關(guān)于鏈霉親和素偶聯(lián)物 FITC-標(biāo)記的方法：

標(biāo)記過程：

準(zhǔn)備FITC溶液：將FITC粉末溶解在乙腈中，制備FITC的工作溶液。通常的濃度是1 mg/mL或更低。確保在暗處操作，因?yàn)镕ITC對光敏感。

激活Streptavidin：使用碳酸氫鈉等化學(xué)試劑激活Streptavidin上的特定氨基酸殘基，以便FITC能夠與之反應(yīng)。激活的Streptavidin通常以堿性緩沖液中處理。

FITC與Streptavidin反應(yīng)：將FITC溶液加入到激活的Streptavidin中，使它們在室溫下反應(yīng)。反應(yīng)時間可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行調(diào)整，通常在1到2小時之間。

反應(yīng)停止：將反應(yīng)停止，通常是通過加入一些組織或蛋白質(zhì)，以中和未反應(yīng)的FITC。這有助于防止未反應(yīng)的FITC殘留在樣品中。

純化共軛物：使用分子量切割膜或其他純化方法，從反應(yīng)混合物中分離出FITC-conjugated Streptavidin。這個步驟可以去除未反應(yīng)的FITC和其他雜質(zhì)。

確認(rèn)共軛物：使用光譜方法或其他分析技術(shù)來確認(rèn)成功標(biāo)記FITC到Streptavidin上。通常會檢測FITC的吸收光譜和熒光光譜。

存儲共軛物：存儲FITC-conjugated Streptavidin，通常在冷藏條件下，以確保其穩(wěn)定性和長期保存。

鏈霉親和素（Streptavidin）偶聯(lián)物中的FITC（Fluorescein Isothiocyanate）是一種常見的熒光標(biāo)記，用于將熒光性質(zhì)引入Streptavidin分子中，以便在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)和應(yīng)用中進(jìn)行熒光標(biāo)記和可視化。FITC的標(biāo)記原理涉及到將FITC與Streptavidin分子中的氨基基團(tuán)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的FITC-Streptavidin共軛物。

Streptavidin/ RBITC，羅丹明B標(biāo)記鏈霉親和素

以上來源于文獻(xiàn)整理，如有侵權(quán)，請聯(lián)系刪除，RL2023.9。