1.?RGD 修飾的線粒體靶向長循環(huán)脂質體(RLP-TPP-1脂質體)：

用前藥三苯基膦(TPP)-白藜蘆醇(1)為模型藥，采用薄膜分散法制備RGD 修飾的線粒體靶向長循環(huán)脂質體(RLP-TPP-1脂質體)。

（1）?將TPP連接藥物1構成前藥TPP-1，利用TPP的線粒體趨向作用攜載藥物進入線粒體，以增加1在作用位點的蓄積。

（2）?由于TPP-1的水溶性仍然較差，生物利用度低，采用脂質體作為載體包載TPP-1，并在脂質體表面修飾聚乙二醇(PEG)和細胞靶向肽RGD(精氨酸-甘氨酸-門冬氨酸)。

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2.?作用：

一方面，脂質體可將疏水性藥物包載于脂質雙分子層中以改善其水溶性，PEG修飾增加長循環(huán)作用；

另一方面，RGD肽通過主動識別人源三陰性乳腺癌細胞MDA-MB-231表面過表達的ανβ3整合素受體，增加細胞對脂質體的攝取，從而進一步增加腫瘤細胞線粒體中的藥物濃度。

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3.?脂質體的制備：

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（1）?合成DSPE-PEG2000-Mal。按摩爾比1.5∶1稱取DSPE和NHS-PEG2000-Mal，溶于無水氯仿中，滴加適量三乙胺，氮氣保護下，在40℃油浴中攪拌反應5 h，薄層色譜法(TLC)監(jiān)測反應進程。反應結束后旋轉蒸除大部分氯仿，將濃縮后的反應體系加至冷乙腈中沉淀未反應的DSPE，離心(2414×g)10 min。取上清液，旋蒸除去有機溶劑，殘留物用雙蒸水4ml溶解，置透析袋(Mw8000～14000)中，用蒸餾水透析48h，除去未反應的NHS-PEG2000-Mal。透析結束后凍干，得產物DSPE-PEG2000-Mal，產率約76.3％。用DSPE和mPEG2000-NHS按相同方法合成DSPE-PEG2000。

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（2）?合成DSPE-PEG2000-RGD。取適量上述所得的DSPE-PEG2000-Mal溶于少量氯仿中，減壓除去有機溶劑形成薄膜，用0.01mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS, pH7.4)水化，水浴超聲2 min，加入1.5 倍當量cRGDyk-cys，4℃反應48 h，產物置透析袋中，用蒸餾水透析2d除去過量的cRGDyk-cys，透析結束后凍干，即得產物DSPE-PEG2000-RGD，并用1H NMR 和FTIR對其進行結構表征。

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4.?試驗結果：

線粒體靶向基團TPP的引入顯著增加了藥物在線粒體內的蓄積，增強治療效果。同時細胞試驗也表明在脂質體表面修飾腫瘤細胞靶向肽RGD能進一步增加細胞對藥物的攝取量。

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關鍵詞（均可定制，PEG分子量可選）：

脂質體表面修飾聚乙二醇(PEG)

細胞靶向肽RGD(精氨酸-甘氨酸-門冬氨酸)

DSPE-PEG2000-Mal

DSPE-PEG2000

NHS-PEG-Mal

DSPE-PEG2000-RGD

DSPE-PEG-RGD

DSPE-PEG2000-cRGD,多肽序列:c(RGDyk)

脂質體表面修飾腫瘤細胞靶向肽RGD

DSPE-PEG(2000)-square

DOPE-PEG-CY5

DOPE-PEG-CY7.5

DOPE-PEG-CY5.5

DSPE-PEG(2000)-TMS

Bis-DSPE-PEG2000

DSPE-PEG2000-TK-NHS

DSPE-PEG2000-GE11

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