Caco-2 (人結(jié)直腸腺癌細胞)分離自一位72歲男性直腸原位癌，人結(jié)腸癌Caco-2細胞系在標準培養(yǎng)條件下匯合后，自發(fā)分化為腸上皮樣細胞，是常用的腸癌細胞模型。

Caco-2細胞分離自直腸原位癌；當長到滿時，Caco-2細胞表現(xiàn)出特征性的腸上皮細胞分化。Caco-2細胞表達維甲酸結(jié)合蛋白I和維甲酸結(jié)合蛋白Ⅱ，并呈角質(zhì)蛋白陽性。

細胞名稱：人結(jié)直腸腺癌細胞

細胞簡稱：Caco-2

細胞別名：CaCo-2; CACO-2; Caco 2; CACO 2; CACO2; CaCo2; CaCO2; Caco2; Caco-2/ATCC

產(chǎn)品貨號：TCH-C146組織來源：結(jié)直腸細胞形態(tài)：上皮樣　生長特性：貼壁生長培養(yǎng)體系：EMEM+20%FBS+1%P/S或DMEM-H+20%FBS+1%P/S

Caco-2細胞培養(yǎng)注意要點

??人結(jié)直腸腺癌細胞（CaCo-2）一般呈島狀生長，Caco-2細胞群中常常含有巨大的空泡，這是CaCo-2細胞本身的特性，屬于正常現(xiàn)象。

??Caco-2傳代周期較長，倍增時間約為72h。這是因為Caco-2貼壁和生長都較為緩慢。按1:4傳代的情況下，約一周傳代一次。

??Caco-2細胞較難消化，細胞間連接緊密，使得細胞難以解離。通常加入胰酶后，細胞克隆的四周先飄起來，中間仍貼壁；隨后整片克隆脫落，但細胞與細胞間不會分散。消化時間為5-10分鐘，該細胞難以被吹散為單個細胞，當細胞能夠被吹散為小的細胞團塊，即可終止消化。

??Caco-2貼壁緩慢，在標準培養(yǎng)條件【EMEM＋20% FBS＋1% P/S】下，接種后需要48小時以上完成貼壁。推薦接種后第三天再換液。期間不要頻繁觀察或晃動培養(yǎng)皿。

??Caco-2有少量發(fā)亮的細胞漂浮或黏附在細胞克隆上，是正常的，隨后會進入克隆并正常生長。所以避免頻繁觀察細胞，可以減少漂浮細胞產(chǎn)生。如果細胞隨著培養(yǎng)過程，漂浮得越來越嚴重，甚至大塊兒飄起，就要檢查培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)環(huán)境是否出現(xiàn)異常。細胞密度越高，消化時間越長。

??血清質(zhì)量差異可能引起細胞狀態(tài)變化，建議選用高質(zhì)量的胎牛血清。

Caco-2細胞常見問題

??細胞不貼壁怎么辦？Caco-2細胞培養(yǎng)基里添加的胎牛血清比例為20%，當血清比例降低，貼壁性下降時，補充胎牛血清至20%，繼續(xù)培養(yǎng)1-2天，細胞即可貼壁。檢查培養(yǎng)基是否偏堿（呈紫紅色），偏堿的培養(yǎng)基可能導(dǎo)致細胞無法貼壁。

??能否用DMEM替代MEM？可以。DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。Caco-2細胞在DMEM+20%FBS+1%P/S條件下生長狀態(tài)正常。

??MEM中不含NEAA會怎樣？當使用不含NEAA的MEM培養(yǎng)基時，Caco-2生長速度可能下降，漂浮細胞增多。

??細胞消化不下來怎么辦？
如果消化5-10分鐘，細胞部分脫落，另一部分仍然貼壁緊密，可以將脫落細胞轉(zhuǎn)移至離心管，向原瓶中加入新的胰酶，放入培養(yǎng)箱繼續(xù)消化剩余細胞，每隔1min拿出來觀察，直到細胞滑落。

??漂浮細胞多怎么辦？
有少量發(fā)亮的細胞漂浮或黏附在細胞克隆上，是正常的，隨后會進入克隆并正常生長。所以避免頻繁觀察細胞，可以減少漂浮細胞產(chǎn)生。如果Caco-2細胞隨著培養(yǎng)過程，漂浮得越來越嚴重，甚至大塊兒飄起，就要檢查培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)環(huán)境是否出現(xiàn)異常了。

作者：Cas9x海星生物

公眾號：海星生物科技

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