蛋白酶 K(39450-01-6,Proteinase K)是一種廣譜絲氨酸蛋白酶,蛋白酶 K于1974年在fungus Engyodontium album的提取物中發(fā)現(xiàn)。蛋白酶 K能夠消化角蛋白，因此被稱為“蛋白酶 K”。蛋白酶 K可水解多種肽鍵，經(jīng)常用于清除酶促反應(yīng)或細(xì)胞裂解液。蛋白酶 K可用在制備DNA和RNA的過(guò)程中去除內(nèi)源性核酸酶，并用于制備原位雜交的組織切片。蛋白酶 K通常在pH7.5-9.0和溫度37-70°C的范圍內(nèi)使用。

溶解度Solubilitysolubility（H2O）: soluble 10mg/mL, clear, colorless

性狀solid power,40unit/mg dry weight

儲(chǔ)藏條件 Storage conditions儲(chǔ)存溫度-4℃

酶活性：
評(píng)估酶的活性和功能的標(biāo)準(zhǔn)是酶活，而不是其純度。1 AU（AU=Anson單位）定義為在37°C、pH 7.5下每分鐘從酪蛋白中釋放1.0 μmol（181 μg）酪氨酸的酶量。

酶促反應(yīng)分三步進(jìn)行：
※ 酶和底物混合在一起
※ 底物與酶的活性位點(diǎn)結(jié)合，形成酶-底物復(fù)合物
※ 反應(yīng)發(fā)生，形成與酶分離的產(chǎn)物。

蛋白酶K應(yīng)用：
※ 在分離DNA和RNA的過(guò)程中，用于核酸酶的蛋白水解失活。
※ 用于去除內(nèi)毒素結(jié)合的陽(yáng)離子蛋白，如溶菌酶和核糖核酸酶A。
※ 其可用于分離肝、酵母和綠豆線粒體
※ 用于測(cè)定酶在細(xì)胞膜上的定位
※ 用于石蠟包埋組織切片的處理，暴露用于抗體標(biāo)記的抗原結(jié)合位點(diǎn)。
※ 用于可傳播海綿狀腦病(TSE)研究中朊病毒腦組織樣本蛋白的消化。

蛋白酶K作用：
蛋白酶K是一種穩(wěn)定且具有高活性的絲氨酸蛋白酶。晶體和分子結(jié)構(gòu)研究證據(jù)表明該酶屬于枯草素家族，具有活性位點(diǎn)催化三聯(lián)體(Asp39-His69-Ser224)。它在一系列廣泛的環(huán)境中均穩(wěn)定：pH，緩沖鹽，去污劑（SDS）以及溫度。 在0.1-0.5% SDS存在的情況下，蛋白酶K可保持活性，在不損害分離DNA完整性的前提下，可以消化DNA制劑中的多種蛋白質(zhì)和核酸酶。