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線粒體呼吸鏈復合體活性檢測解決方案

2021-04-06 16:35 作者:艾美捷  | 我要投稿

一、線粒體呼吸鏈簡介:

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線粒體呼吸鏈,在生物細胞中,接受代謝物上脫下的氫(或電子)的載體有三種——?NAD+、NADP+和FAD。其中NADPH不進入呼吸鏈合成ATP,而是作為生物合成的還原劑;只有NADH和FADH2進入呼吸鏈。

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二、線粒體呼吸鏈傳遞體順序

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呼吸鏈中的電子傳遞有著嚴格的方向和順序,即電子從氧化還原電位較低的傳遞體依次通過氧化還原電位較高的傳遞體逐步流向氧分子遞氫體與電化學梯度的建立。

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三、線粒體呼吸鏈復合體

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呼吸作用是生物體內(nèi)zui基礎的能量代謝活動之一,是由位于線粒體內(nèi)膜上的四種呼吸鏈蛋白復合物分步完成的,這四種蛋白復合物分別為復合物?I(NADH?脫氫酶)、復合物?II(琥珀酸-輔酶?Q?還原酶)、復合物?III(細胞色素?c?還原酶)和復合物?IV(細胞色素?c?氧化酶)。

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四、線粒體呼吸鏈復合體的生物學意義

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據(jù)統(tǒng)計,約有30-40%線粒體病是由于線粒體呼吸鏈酶復合體缺陷所致,通常采用線粒體基因組分析與線粒體呼吸鏈酶活性檢測相結合的方式予以確診。

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帕金森?。≒arkinson’s disease, PD)、亨廷頓舞蹈?。℉untington's disease,HD)等神經(jīng)退行性疾病的線粒體功能障礙和能量代謝異常已成為當今共識的早期病理現(xiàn)象, Cardellach研究表明PD患者線粒體復合體I、IV酶活性功能受損;?Lambert MP研究證明線粒體機能障礙在HD發(fā)病機制中扮演著重要角色,其線粒體復合體II酶活性丟失,鐵硫中心和FAD兩個亞基表達降低。

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線粒體呼吸鏈復合體I/II/III/IV/V的結構和功能已被廣泛研究。目前臨床上以營養(yǎng)支持對癥治療復合體缺陷或酶活性異常,從而改善患者癥狀及延緩病情發(fā)展,然而其確切的發(fā)病機制和特異性治療方法仍亟待解決。

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五、Abbkine?電子傳遞鏈相關研究工具


CheKine?線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ-Ⅴ活性檢測試劑盒(比色法)提供了一種更細致準確的復合體Ⅰ-Ⅴ活性檢測方法,可以兼容檢測多種類型的樣本。

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1.CheKine?線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ活性檢測試劑盒(比色法)檢測原理

基于線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ能夠催化NADH脫氫生成NAD+,直接讀取340nm下NADH的氧化速率從而計算出該酶活性的大小,操作簡單方便,檢測更靈敏準確。

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2.CheKine?線粒體呼吸鏈復合體Ⅱ活性檢測試劑盒(比色法)

是復合體Ⅱ的催化產(chǎn)物還原型輔酶Q可進一步還原2,6-二氯吲哚酚,2,6-二氯吲哚酚在605 nm有特征吸收峰,通過檢測2,6-二氯吲哚酚的減少速率來計算復合體Ⅱ的活性。該方法操作簡單方便,檢測更靈敏準確。

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3.CheKine?線粒體呼吸鏈復合體Ⅲ活性檢測試劑盒(比色法)

是線粒體呼吸鏈復合體Ⅲ把還原型CoQ的氫傳遞給細胞色素C,生成還原型細胞色素C,與氧化型細胞色素C不同,還原型細胞色素C在550nm有特征光吸收,因此550nm光吸收增加速率能夠反映線粒體呼吸鏈Ⅲ酶活性。該方法操作簡單方便,檢測更靈敏準確。

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4.CheKine?線粒體呼吸鏈復合體Ⅳ活性檢測試劑盒(比色法)

其檢測原理是還原型細胞色素C在550nm有特征光吸收,線粒體呼吸鏈復合體Ⅳ可以催化還原型細胞色素C生成氧化型細胞色素C,因此550nm光吸收下降速率能夠反映線粒體呼吸鏈復合體Ⅳ酶活性。該檢測方法操作簡單方便,檢測更靈敏準確。

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5.CheKine?線粒體呼吸鏈復合體Ⅴ活性檢測試劑盒(比色法)

是復合體Ⅴ可以水解ATP產(chǎn)生ADP和Pi,然后可以通過測定Pi增加速率來檢測線粒體呼吸鏈復合體Ⅴ的活性。該方法操作簡單方便,檢測更靈敏準確。

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文章來源:線粒體呼吸鏈復合體及其生物學意義

http://www.abbkine.cn/mitochondrial-complex


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