最近學習定量PCR和數(shù)字PCR，然后就遇到各種PCR技術，PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR和ddPCR，有幾個長得好像，怎么區(qū)分呢？今天一舉搞定它。

01、普通PCR

PCR是普通PCR，以雙鏈DNA為模板，以dNTP為底物，特異性地擴增雙鏈DNA。然后采用瓊脂糖凝膠電泳對產(chǎn)物進行檢測，只能做定性分析。

02、實時熒光定量PCR

qPCR和Real-time PCR是實時熒光定量PCR，以cDNA為模板，以dNTP為底物，對擴增出的DNA進行定量分析。實時熒光定量PCR常用的方法：水解探針法和熒光染料法。

03、逆轉錄PCR

RT-PCR 是逆轉錄PCR，采用 Oligo（dT） 或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成 cDNA，再以 cDNA 為模板進行 PCR 擴增，結果只能定性，不能定量。

04、實時熒光定量逆轉錄PCR

RT-qPCR是實時熒光定量逆轉錄PCR，是qPCR+RT-PCR的組合，將總RNA或mRNA逆轉錄成cDNA后再作為模板，以dNTP為底物，進行qPCR的定量分析。

05、數(shù)字PCR

dPCR是數(shù)字PCR即三代PCR，是一種能夠實現(xiàn)核酸絕對定量的精準檢測技術，基于泊松分布原理將核酸樣品分配到大量獨立、平行的微反應單元（納升級）中，使每個反應室中平均只有一個拷貝或者沒有目標DNA分子，然后加入熒光信號進行擴增，從而實現(xiàn)靶標核酸分子的絕對計數(shù)，提高檢測靈敏度和準確度。

Q

各種PCR的全稱

A:

① 聚合酶鏈式反應（Polymerase Chain Reaction，PCR）

②實時熒光定量PCR（Quantitative Real-time PCR，qPCR）

③ 逆轉錄PCR（RT-PCR）

④實時熒光定量逆轉錄PCR（Real-time RT-PCR，RT-qPCR）

數(shù)字PCR（Digital PCR，Dig-PCR，dPCR）