如何清除PCR實(shí)驗(yàn)室核酸氣溶膠污染?
關(guān)鍵詞:氣溶膠污染 ? ?實(shí)驗(yàn)室污染? ?實(shí)驗(yàn)室核酸污染去除
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一個(gè)好的實(shí)驗(yàn)室,要時(shí)刻注意污染的監(jiān)測(cè),考慮有無(wú)污染,是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。

首先,要辨別PCR污染的來(lái)源,是環(huán)境污染,還是PCR反應(yīng)液的污染?
設(shè)立陰陽(yáng)性對(duì)照,有利于檢測(cè)反應(yīng)體系各成分的污染情況。尤其是設(shè)立空白對(duì)照,這對(duì)檢測(cè)試劑中PCR產(chǎn)物殘留污染是非常有益的。
在排除試劑污染的可能性,并更換試劑后,若不久又發(fā)現(xiàn)試劑被污染了,則考慮可能為環(huán)境污染。環(huán)境污染的最主要原因是DNA溶液的濺出和DNA氣溶膠造成的實(shí)驗(yàn)區(qū)域的污染,這在PCR產(chǎn)物擴(kuò)增區(qū)尤其容易出現(xiàn)。移液器槍頭和EP管架是比較常見(jiàn)的污染部位。
如果是環(huán)境污染,還可對(duì)每個(gè)區(qū)域進(jìn)行涂抹采樣和核酸提取,以最終鑒定污染的區(qū)域所在。
對(duì)PCR的環(huán)境污染,有如下幾種治理方法:
1、用常規(guī)消毒液定期在環(huán)境中噴霧消毒處理。
2、稀酸處理法:對(duì)可疑器具用1mol/L鹽酸擦拭或浸泡,使殘余DNA脫嘌呤;此方法缺點(diǎn)是鹽酸對(duì)皮膚有一定的腐蝕性。
3、紫外照射法:紫外波長(zhǎng)一般選擇—,照射30分鐘至2小時(shí)。但需要注意的是,UV照射僅對(duì)以上長(zhǎng)片段有效,對(duì)短片段效果不大。
4、選用商品化的核酸DNA污染祛除劑。

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