293細胞系是從原代胚胎人類腎臟轉(zhuǎn)化而來的永久性細胞系人腺病毒5型DNA。腺病毒E1區(qū)（E1a和E1b）編碼的基因為在這些細胞中表達，并參與病毒啟動子的反式激活，使這些細胞產(chǎn)生高水平的蛋白質(zhì)。E1還補充重組腺病毒載體中的E1缺失，允許病毒復制。Cell Biolabs

293/Cas9細胞系穩(wěn)定表達Cas9和嘌呤霉素抗性基因。利用逆轉(zhuǎn)錄病毒將Cas9和嘌呤霉素抗性基因?qū)胗H代293細胞。

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Cell Biolabs

Cell Biolabs：細胞學試劑品牌，為生物技術(shù)和研究類客戶提供基于細胞功能研究以及疾病等方面的技術(shù)和服務(wù)。主要涵蓋細胞研究、細胞信號通路和蛋白質(zhì)生物學、代謝研究、病原體和毒素、干細胞研究等領(lǐng)域。

Cell Biolabs?/?艾美捷?293/Cas9細胞系表達Cas9蛋白。293個細胞或293/Cas9細胞用酶裂解RIPA緩沖液，并使用Cell Biolab的Cas9 ELISA試劑盒（Cat#PRB-5079）檢測Cas9蛋白水平（見下圖）。

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Cell Biolabs?293/Cas9細胞，通過形態(tài)學測定，臺盼藍染料排除，活細胞計數(shù)。293/Cas9細胞已經(jīng)過測試，沒有微生物污染。

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1.培養(yǎng)基：DMEM（高糖），10%胎牛血清（FBS），0.1 mM MEM非必需氨基酸（NEAA），2 mM L-谷氨酰胺，1%Pen-Strep，（可選）1-2μg/mL嘌呤霉素。

2.冷凍培養(yǎng)基：70%DMEM、20%FBS、10%DMSO。

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從冷凍細胞建立293/Cas9培養(yǎng)基

1.將10毫升完整的DMEM生長培養(yǎng)基置于50毫升錐形管中。解凍冰凍的食物在37°C水浴中輕輕攪拌，在1-2分鐘內(nèi)將細胞冷凍。凈化空氣用70%（v/v）乙醇擦拭冷凍瓶表面。

2.將解凍的細胞懸浮液轉(zhuǎn)移到含有10mL生長培養(yǎng)基的錐形管中。

3.在室溫下，以1000 rpm的轉(zhuǎn)速離心5分鐘，收集細胞。移除通過抽吸生長培養(yǎng)基。

4.通過輕輕移液，將細胞重新懸浮在錐形管中的15ml新鮮生長培養(yǎng)基中然后下來。

5.將15 mL細胞懸浮液轉(zhuǎn)移至T-75組織培養(yǎng)瓶中。將電池置于37°C的溫度下培養(yǎng)箱中的二氧化碳濃度為5%。

6.每天監(jiān)測細胞密度。細胞應在培養(yǎng)物達到95%匯合時傳代。

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Cell Biolabs?相關(guān)試劑盒研究方案：

1.CBA-100：細胞選擇??24孔細胞遷移試驗（8μm，比色法）

2.CBA-106：細胞選擇??96孔細胞遷移分析（8μm，熒光法）

3.CBA-120：細胞選擇??24孔傷口愈合試驗（顯微鏡）

4.CBA-125：半徑??24孔細胞遷移分析（顯微鏡）

5.CBA-126：半徑??96孔細胞遷移分析（顯微鏡）

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艾美捷科技是Cell Biolabs的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。