免疫沉淀技術(shù)可以與基因組技術(shù)、放射同位素技術(shù)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、免疫印跡等實驗方法相結(jié)合，對較復(fù)雜的蛋白質(zhì)與DNA/RNA的關(guān)系和定位提供非常好的解決方法。先了解這幾種方法的區(qū)別：

當(dāng)然，再結(jié)合其他技術(shù)還可以衍生出更多的技術(shù)，本篇先來剖析一下染色質(zhì)免疫沉淀（CHIP）。

染色質(zhì)免疫沉淀 (ChIP) 是研究體內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)相互作用的方法。其原理是在活細胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物，并將其隨機切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段。后期通過對目的片斷的純化與檢測，從而獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。

應(yīng)用：ChIP可以用來檢測體內(nèi)反式作用因子與DNA的動態(tài)作用，還可以用來研究組蛋白的各種共價修飾與基因表達的關(guān)系。而且，ChIP與其他方法的結(jié)合擴大了其應(yīng)用范圍：ChIP與基因芯片相結(jié)合建立的ChIP-on-chip方法已廣泛用于特定反式因子靶基因的高通量篩選；ChIP與體內(nèi)足跡法相結(jié)合，用于尋找反式因子的體內(nèi)結(jié)合位點；RNA-ChIP用于研究RNA在基因表達調(diào)控中的作用。

操作也可以很簡單

1

甲醛處理細胞

2

收集細胞，超聲破碎

3

加入目的蛋白的抗體，與靶蛋白-DNA復(fù)合物相互結(jié)合

4

加入ProteinA，結(jié)合抗體-靶蛋白-DNA復(fù)合物，沉淀

5

對沉淀下來的復(fù)合物進行清洗，除去一些非特異性結(jié)合

6

洗脫，得到富集的靶蛋白-DNA復(fù)合物

7

解交聯(lián)，純化富集的DNA-片斷

8

PCR或基因芯片分析

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普健就有專業(yè)的CHIP檢測服務(wù)，

直接來找我！

勤勤懇懇，辛辛苦苦操作了老半天

翹首以待實驗成果

然后有人歡喜有人憂

怎么把“驚嚇”變成“驚喜”

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只要找到破解方法，

所有的問題都不是問題！

今天我們就來一一擊破

免疫沉淀系列實驗中那些揪心的問題。

1 WB結(jié)果背景高且不均勻

2 WB結(jié)果信號弱或無信號

3 雜帶較多/特異性條帶異常

如果你的WB實驗出現(xiàn)了這些問題，

這些方案供你參考，

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問題多，方法更多。

小編更希望你們實驗開掛，這些問題統(tǒng)統(tǒng)木有！