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細胞因子釋放、酶活檢測的原理及方法—源井生物

2021-05-11 09:49 作者:源井生物  | 我要投稿

細胞因子釋放、酶活檢測cytokine secretion、enzyme activity

細胞因子(cytokine)是由細胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物質(zhì)的統(tǒng)稱。在免疫應(yīng)答過程中,細胞因子在免疫調(diào)節(jié)、炎癥應(yīng)答、腫瘤轉(zhuǎn)移等生理和病理過程中起重要作用。細胞因子的檢測不僅是基礎(chǔ)免疫研究的有較手段,同時在臨床疾病診斷、病程觀察、療效判斷及細胞因子治療監(jiān)測方面具有重要價值。

技術(shù)原理

ELISA(Enzyme Linked Immunosorbent Assay)的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。


結(jié)果示例

參考文獻 Ishizuka, Jeffrey J et al. “Loss of ADAR1 in tumours overcomes resistance to immune checkpoint blockade.” Nature vol. 565,7737 (2019): 43-48. doi:10.1038/s41586-018-0768-9

服務(wù)周期及結(jié)果


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