免疫印跡(WB)、免疫組化 (IHC)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA)，是免疫學(xué)三大常用工具，應(yīng)用于目的蛋白的定位、定性和定量。

WB(免疫蛋白印跡法 Western Blot)是檢測(cè)蛋白質(zhì)特性、表達(dá)與分布的一種最常用的方法。實(shí)驗(yàn)中需要先要進(jìn)行SDS-PAGE，然后將分離開的蛋白質(zhì)樣品用電轉(zhuǎn)儀轉(zhuǎn)移到固相載體上而后利用抗原-抗體-標(biāo)記物顯色來檢測(cè)樣品，可以用于定性和半定量。

IHC(免疫組化Immunohistochemistry)

是融合了免疫學(xué)原理(抗原抗體特異性結(jié)合)和組織學(xué)技術(shù)(組織的取材、固定、包埋、切片、脫蠟、水化等)，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色，來對(duì)組織(細(xì)胞)內(nèi)抗原進(jìn)行定位、定性及定量的研究(主要是定位)。樣本是細(xì)胞或組織，要在顯微鏡下觀察結(jié)果，可能出現(xiàn)膜陽性、質(zhì)陽性和核陽性。

ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)Enzyme linkedimmunosorbentassay)

用到了免疫學(xué)原理和化學(xué)反應(yīng)顯色，待測(cè)的樣品多是血清、血漿、尿液、細(xì)胞或組織培養(yǎng)上清液，因而沒有用到組織包埋、切片等技術(shù)，這是與免疫組化的主要區(qū)別，操作上開始需要將抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面，從而使后來形成的抗原-抗體-酶-底物復(fù)合物粘附在載體上，這就是“吸附”的含義。

對(duì)于IHC來說，定位是免疫組化最大的優(yōu)勢(shì)該方法可在組織和細(xì)胞中進(jìn)行抗原的準(zhǔn)確定位因而可同時(shí)對(duì)不同抗原在同一組織或細(xì)胞中進(jìn)行定位觀察，這樣就可以進(jìn)行形態(tài)與功能相結(jié)合的研究，相比于其他蛋白檢測(cè)方法，免疫組化具有定位較直接準(zhǔn)確、定性靈敏度高，是定位檢測(cè)分析首選方法對(duì)病理學(xué)領(lǐng)域開展深入研究是十分有意義，尤其對(duì)于有些因子的轉(zhuǎn)位研究十分有用。WB與IHC技術(shù)相比，定量可能更加準(zhǔn)確

當(dāng)然WB也可定性和定位(通過提取膜蛋白或核蛋白、胞漿蛋白分別檢測(cè)其中抗原含量，進(jìn)而間接反映它們的定位)，但敏感性遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于IHCELISA與免疫組化技術(shù)相比，定量最準(zhǔn)確，是分泌性蛋白檢測(cè)首選方法之一。

尤其對(duì)于微定量分析多個(gè)樣本非常有用，所用試劑和樣品量很少，結(jié)果精確。IHC針對(duì)性比較強(qiáng)，而且一般是以組織或者細(xì)胞為樣本，而ELISA般是使用血清或者組織磨碎液。免疫組化可以快速檢測(cè)樣本中抗體的陽性或者陰性，一般不用于定量檢測(cè)。